作者：孙一晟; 姚苹苹; 杨章女; 徐芳; 卢杭景; ...柯萨奇病毒细胞凋亡沙鼠机理
摘要：目的研究柯萨奇病毒A组16型（CV-A16）对沙鼠原代肌肉细胞的杀伤机理，为阐明CV-A16的致病机理及沙鼠模型的进一步应用提供依据。方法采用胰蛋白酶/胶原酶双酶法构建沙鼠原代肌肉细胞模型，用不同感染剂量CV-A16感染细胞24 h，采用CCK-8法检测细胞存活率，Hoechst 33258染色法检测细胞染色质变化，Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡比例，蛋白免疫印迹法检测Caspases家族蛋白、NF-κB通路相关蛋白及JNK激酶表达。结果感染复数（MOI）=0.50和1.00组细胞存活率分别为88.95%和64.05%，与阴性对照组（100.00%）比较，差异均有统计学意义（P＜0.05），细胞存活率与MOI呈负相关（rs=-0.857，P=0.014）；MOI=0.01、0.10和1.00组细胞凋亡比例分别为7.2%、21.8%和50.7%，细胞凋亡比例与MOI呈正相关（rs=1.000，P＜0.001）。CV-A16感染后，Caspase-3和Caspase-8蛋白均被剪切激活，NF-κB通路相关蛋白IκBα、p65和p-p65表达均减少，JNK蛋白磷酸化水平增加。结论CV-A16可能通过抑制NF-κB通路和激活JNK激酶诱导沙鼠原代肌肉细胞凋亡。
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