作者:孙卓; 卢今奇; 吴牧雨; 李明岩; 邢月萍; ...pten有丝分裂纺锤体eg5
摘要:目的探讨PTEN干扰对有丝分裂纺锤体形成的影响及其可能机制。方法用慢病毒干扰载体及阴性对照载体转染HeLa细胞后采用qPCR及Westernblot技术检测PTEN mRNA及蛋白表达水平,有丝分裂测定实验镜下观察细胞有丝分裂指数,免疫荧光染色技术观察纺锤体的形态、结构,Westernblot实验检测Eg5蛋白表达变化。结果PTEN shRNA转染HeLa细胞后,PTEN的mRNA及蛋白表达水平均明显下调(P〈0.05);与对照组相比,shPTEN组细胞的有丝分裂指数明显上调(P〈0.01);免疫荧光结果显示shControl组中可见正常的纺锤体形成,而shPTEN组中可见形态及结构异常的纺锤体,且纺锤体的长度显著小于对照组(P〈0.01);驱动蛋白Eg5在shPTEN组中表达明显低于对照组(P〈0.05)。结论PTEN干扰可能通过下调Eg5蛋白的表达水平导致有丝分裂及纺锤体形成异常。
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