作者：李文杰; 郭冰冰; 路明高迁移率族蛋白b1心脏成纤维细胞增殖
摘要：目的：探讨siRNA干扰高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达能否有效抑制 AngⅡ诱导的心成纤维细胞（CFs）的增殖及胶原分泌，从而为心肌纤维化的发生提供新的认识，为心肌纤维化的治疗提供新的思路。方法酶消化法分离小鼠心脏成纤维细胞，差速贴壁法去除心肌细胞。波形蛋白和 DDR2免疫细胞化学染色鉴定成纤维细胞，将CFs分为：A组（正常对照组）：培养时不加干预药物； B组（AngⅡ组）：加 AngⅡ10－6 mol／L；C 组（AngⅡ＋HMGB1siRNA 组）：HMGB1siRNA 转染CFs后加 AngⅡ10－6 mol／L；D 组（AngⅡ＋阴性对照 siRNA 组）：阴性对照 siRNA 转染 CFs 后加 AngⅡ10－6mol／L。各组细胞培养48 h后，采用CCK8比色法检测 CFs 细胞增殖， ELISA法检测上清液胶原含量，RT －PCR 法测定细胞 HMGB1mRNA 表达。结果使用酶消化法和差速贴壁法获得的高纯度细胞符合成纤维细胞的形态特征并且波形蛋白与 DDR2免疫细胞化学染色阳性；与 A 组比较，B组CFs增殖，上清液胶原含量均明显增加（P ＜0．05）；HMGB1mRNA 表达明显上调（P ＜0．05），与 B 组比较，C组CFs增殖，上清液胶原含量显著降低（P ＜0．05），HMGB1 mRNA表达显著下调（P ＜0．05）。 B组与D组差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论HMGB1参与了 AngⅡ诱导的CFs增殖及胶原表达过程，siRNA 干扰 HMGB1表达可有效抑制AngⅡ诱导的CFs的增殖及胶原分泌。
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