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特异性siRNA的筛选及CTGF—shRNA质粒的构建

作者:金培生; 沈才齐; 李雪阳; 张爱君; 陶常波...结缔组织生长因子成纤维细胞rna干扰短发夹rna质粒

摘要:目的构建结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)重组质粒,研究其在人皮肤瘢痕成纤维细胞中对CTGF基因表达的沉默效果,为探讨病理性瘢痕的基因治疗奠定基础。方法设计针对人CTGF基因特异性的3条siRNAoligo,通RT—PCR及Westernblot检测其在瘢痕成纤维细胞中的干扰效果,从中筛选出一条最佳片段。根据所筛选出的最佳片段序列设计并构建CTGF—shR—NA质粒,通过单酶切和测序鉴定该质粒。结果3条siRNAoligo中c3序列干扰效果最佳。酶切鉴定和测序分析证实重组质粒构建成功。结论成功构建CTGF—shRNA质粒,为进一步探索CTGF对人皮肤病理性瘢痕形成的作用奠定了基础。

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徐州医科大学学报

《徐州医科大学学报》(CN:32-1875/R)是一本有较高学术价值的大型月刊,自创刊以来,选题新奇而不失报道广度,服务大众而不失理论高度。颇受业界和广大读者的关注和好评。 《徐州医科大学学报》创刊至今多次获江苏省优秀科技期刊二等奖,国家教育部优秀科技期刊编辑奖等。主要刊登医学基础研究、临床实验研究、预防医学和全科医学方面的论著、综述,也刊登临床方法学、经验介绍方面的论文。

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