作者：高迎春; 蒋小青胎膜体外孵育方法脂多糖
摘要：目的探讨人胎膜体外孵育的方法，为进一步研究胎膜的结构和功能提供一种新的方法。方法取20例正常选择性剖宫产者的胎膜，在DMEM／F-12培养基中进行孵育，共孵育96h，每24h换液并测定胎膜的存活力，镐h后一部分胎膜分别给予细菌内毒素脂多糖（LPS）和LPS＋N-乙酰半胱氨酸（NAC）刺激孵育中的胎膜24h。苏木精-伊红染色观察细胞形态，免疫组化方法检测各时间点胎膜中的基质金属酶-9（MMP-9）的表达情况，了解胎膜细胞的功能。结果20例胎膜的平均存活力24h为87％±1．9％，镐h为85％±1．3％，72h为83％±1．6％。96h为37％±1．2％；前三者两两比较无统计学差异（P〉0．05），前三者分别与96h组比较均有统计学差异（P〈0．05）。苏木精-伊红染色观察细胞形态变化，0-72h细胞形态良好、饱满，72h后细胞开始皱缩，至96h大部分细胞死亡。免疫组化示0h及48h的胎膜MMP-9的表达微弱，24h的MMP-9表达较前增强，LPS作用后MMP-9的表达明显增强，同时给予LPS＋NAC的MMP-9表达又明显下降。结论DMEM／F-12培养基体外孵育胎膜是可行的，且方法简单。
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