作者：陈家存; 张俊杰; 温儒民; 薛松; 胡书群; ...膀胱癌单克隆抗体轻链可变区原核表达载体基因克隆基因疗法
摘要：目的克隆抗人膀胱癌单克隆抗体轻链可变区基因(VL),并构建其原核表达载体.方法从能分泌抗人膀胱癌单克隆抗体的杂交瘤细胞BDI-1中提取总RNA,通过RT-PCR扩增出VL cDNA.用HindⅢ和XhoⅠ酶切纯化的RT-PCR产物和原核表达载体pET28a(+),在T4 DNA连接酶作用下室温连接,重组质粒经酶切鉴定,阳性克隆测序并进行序列分析.结果扩增出VL cDN段,大小约为340bp,重组质粒的酶切鉴定结果与预期一致.VL基因序列长度为324bp,编码108个氨基酸.VL基因属于鼠免疫球蛋白κ轻链Ⅳ亚类.结论成功克隆出抗人膀胱癌单克隆抗体轻链可变区基因,并成功构建其原核表达载体.
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
