作者:袁红雨; 祝莉莉; 何光存全长cdna文库水稻褐飞虱
摘要:以褐飞虱取食32 h的水稻幼苗为材料构建了cDNA文库,初始文库含3.2×106个克隆,重组率为86%,取1.0×106个克隆子扩增一次,收集到80 mL滴度为1.2×109 pfu/mL的扩增文库.随机挑取20个克隆以T7和M13 reverse为引物进行PCR扩增,以鉴定插入片段的大小,结果发现多数片段的长度在1~4.0Kb左右,少数片段在4 Kb以上,个别片段在6 Kb左右.以在受褐飞虱取食的水稻幼苗中特异表达的ESTBpHi008为探针,筛选cDNA文库,得到该基因的cDNA全长.
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