作者：李宪奎; 张百芳; 彭芳芳; 杞少华; 沈晗; ...tdag51凋亡pc12
摘要：目的探讨TDAG51基因在PC12细胞中的表达及其作用机制.方法实验分为3组,实验组用绿色荧光蛋白质粒(pEGFP -C1)载体把外源性TDAG51基因转染的PC12细胞;空载体对照组用pEGFP-C1转染的PC12细胞;对照组未转染任何试剂的PC12细胞.在转染后24 h、48 h、72 h收集细胞,用Western blotting检测过表达的TDAG51蛋白;转染后84 h用相差显微镜观察PC12细胞形态的变化;Hoechst33258染色观察细胞核形态变化;检测凋亡执行蛋白Caspase-3的变化.结果 TDAG51基因在PC12细胞中高表达;TDAG51基因过表达的细胞与两对照组细胞相比较,胞体变圆,轴突缺失;荧光显微镜下观察PC12细胞可见胞核固缩、染色质凝集,并可见核碎片;前Caspase-3蛋白活化被切割;活化的17kDaCaspase-3随TDAG51蛋白的作用时间延长而增多.结论过表达TDAG51基因可诱导PC12细胞凋亡.
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