作者：张艳芳; 赵春澎vegf165真核表达载体重组质粒人血管内皮细胞血管内皮生长因子基因大肠杆菌高效表达克隆和表达感受态
摘要：目的获得人血管内皮生长因子(hVEGF165)cDNA,构建真核表达载体,并研究其在大肠杆菌中的表达情况.方法采用PCR方法,从HL60细胞中扩增出hVEGF165cDNA,将其克隆至pcDNA3真核表达载体上,构建成为pCD-hVEF165重组质粒.将重组质粒转染感受态的大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,用Western blot检测表达产物.结果经酶切鉴定及基因测序证实hVEGF165cDNA基因克隆成功,并建立了高效表达的pCD-hVEGF165重组质粒.Western blot检测表明,组建了具有高效表达hVEGF165的大肠杆菌菌株.结论成功地克隆和表达出了hVEGF165基因,为进一步建立VEHF转基因动物模型,研究其在视网膜新生血管性疾病中的应用奠定了基础.
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