作者：余奕言; 李涛; 谭晓秋; 李妙龄血管紧张素ii受体质粒构建
摘要：目的：血管紧张素II（AngII）作为肾素-血管紧张素系统（RAS）中重要的致心律失常的肽类物质，主要通过与细胞膜上AT1、AT2两种受体亚型结合而发挥其生物学作用。本研究构建带有荧光蛋白标记的AT1R和AT2R质粒，旨在为进一步观察其生物学效应奠定基础。方法：通过PCR扩增出含有BamH I和Hind III酶切位点的目的基因（AT1R、AT2R）片段，然后分别与有着相同酶切位点的载体pDsRed-N1 、pEGFP-N3连接。将重组子转入TOP10感受态细胞中，通过抗生素筛选、酶切鉴定等方法挑选出阳性克隆，并经测序鉴定。结果：经过定向克隆的方法，最后得到的表达质粒酶切结果正确，测序结果与基因库数据基本一致。结论：成功构建带有红色荧光表达人心房肌AT1R、AT2R的质粒pDsRed—N1-ATIR、pDsRed-N1-AT2R和带有绿色荧光表达人心房肌AT1R、AT2R的质粒pEGFP-N3-AT1R、pEGFP-N3-AT2R。
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