作者：方红; 杨文理; 何涛质粒dna制备酶切转染慢病毒包装
摘要：目的：建立简便易行、成本低廉和安全可靠的高纯度质粒大量制备方法，探讨其在分子生物学研究中的应用。方法：培养含目的质粒的菌株，运用改良后的碱裂解法大量提取质粒DNA并进行纯化，微量核酸仪测定质粒DNA的产量及纯度；采用琼脂糖凝胶电泳、限制性核酸内切酶酶切、转染哺乳动物细胞和慢病毒包装，鉴定质粒DNA的质量及转染效率。结果：本质粒提取方法获得质粒DNA产量为2．5mg／L菌液，OD260/OD280=1．91；以超螺旋质粒DNA为主；限制性核酸内切酶可完全酶切；哺乳动物细胞转染效率在85％以上；可用于慢病毒包装。结论：本方法抽提质粒DNA操作简单、经济实用，可替代质粒大量提取试剂盒获得高产优质的质粒DNA，充分满足了分子生物学实验的要求。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
