作者：梅志强; 张连美; 于海清; 段承刚; 杨曼曼...菌落pcr改良trim28
摘要：目的：建立简便、可靠基因克隆菌落阳性重组子的筛选方法。方法：应用普通菌落PCR和改良的菌落PCR方法对TRIM28基因的阳性重组体进行阳性重组子的分析比较，同时探讨了PCR反应体系中模板浓度和DMSO对于扩增效率的影响。并对鉴定结果为阳性的克隆进行了进一步酶切和蛋白诱导表达分析。结果：运用改良的菌落PCR法简单快捷，结果可靠，反应体系中DMSO的浓度为4％左右可以很好地促进GC富集DNA模板的PCR扩增。其方法的可靠性得到了酶切验证和重组蛋白表达证实。结论：应用改良方法可以用于快速有效地筛选阳性重组菌落。
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