作者:赵春玲; 张春来; 徐倩; 杨烨; 张春燕马桑内酯癫痫人参皂甙rb1双向电泳蛋白质组
摘要:目的:观察人参皂甙Rb1(GRb1)对马桑内酯(CL)所致大鼠癫痫及海马神经元损伤的作用,运用双向电泳(2-DE)技术获得可能与CL癫痫发作及GRb1神经保护作用有关的蛋白质成分,探讨海马组织蛋白质在癫痫发生发展过程中的作用和地位及GRb1对其的影响。方法:雄性成年SD大鼠随机均分为对照组、CL组和GRb1+CL组(n=10)。GRb1+CL组在实验前3d,大鼠每日灌胃GRb1(1.5mg/ml,30mg/kg),另2组灌胃等量生理盐水;实验日CL组和GRb1+CL组腹腔注射CL(1mg/ml,4mg/kg),对照组腹腔注射等量生理盐水。观察各组大鼠的行为学变化3h。各组半数动物麻醉后灌注固定,HE染色观察海马组织学改变。半数动物,断头处死剥离海马组织并提取蛋白,双向电泳(2-DE)分离,ImageMaster 2D Platinum v5.0软件差异表达蛋白质组分析,基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白质。结果:①癫痫发作的行为表现:对照组大鼠未见痫性发作;CL组痫性发作程度较高(Ⅲ~Ⅴ级);与CL组相比,GRb1+CL组大鼠的痫性发作程度明显减低,潜伏期变长,持续时间变短(P〈0.01)。②海马组织学(HE染色)改变:对照组大鼠海马组织结构正常;CL组大鼠可见海马神经元变性坏死,尤以CA3区和齿状回最明显;GRb1+CL组大鼠海马神经元结构无明显改变。③获得大鼠海马组织蛋白质组双向电泳图谱;差异表达蛋白质组分析显示GRb1+CL组与对照组差异蛋白斑点84个,GRb1+CL组与CL组差异蛋白斑点120个。④鉴定出6个蛋白质分别是:脑肌酸激酶(brain creatine kinase)、吞蛋白A1(endophilin-A1)、UPF0628蛋白C10orf96同源物(UPF0628 proteinC10orf96 homolog)、细胞色素P-450(cytochrome P-450)、磷导素样蛋白(phosducin-like protein)及桥整合蛋白3(bridging inte-grator 3)。其中前3个蛋白质在GRb1+CL组表达低于CL组,后3个蛋白质在GRb1+CL组表
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