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大鼠骨髓主要细胞成分的分离获取及其免疫调节作用

作者:姜隽; 欧阳芳; 姜睿大鼠骨髓细胞骨髓间充质干细胞不成熟树突细胞

摘要:目的:建立分离获取大鼠骨髓主要细胞成分的方法,了解其免疫调节作用,为骨髓主要细胞成分输注诱导同种异基因移植物免疫耐受奠定基础。方法:采用密度梯度离心法、红细胞裂解法及细胞培养等方法,分离纯化供体大鼠骨髓细胞(donor bone marrow cells,DBMC)、骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)、不成熟树突细胞(immature dendritic cells,imDC),经光镜、电镜形态学、FCM测定imDC表面OX-62、MHC—Ⅱ、CD80和CD86表达、MSC表面CD80-CD86-和CD29表达等细胞表面标志的表型鉴定后,用MTT法检测DBMC、MSC和imDC对供受体混合淋巴细胞反应(Mixed lymphocytes reaction,MLR)的免疫调节作用。结果:分离获取大鼠骨髓主要细胞成分纯度可达85%-90%,活力〉95%,均经光镜、电镜形态学、FCM等表型鉴定合格,其中,imDC表面OX-62、MHC—Ⅱ、CD80和CD86表达量分别是90.5%±16.4%、89.5%±6.2%、32.5%±9.2%和27.6%±8.3%;MSC表面CD80-CD86-和CD29表达量分别是86.068%±10.33%和61.77%±6.79%。MLR表明大鼠骨髓主要细胞成分对MLR均有显著抑制作用(P〈0.05),DBMC对MLR具有供体特异性免疫调节作用。结论:建立的大鼠DBMC、MSC、imDC分离纯化方法简便易行,所获取的细胞活力、纯度高,可用于实验目的。DBMC、MSC、imDC对受体淋巴细胞增殖反应均有不同程度的免疫调节作用。

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西南医科大学学报

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