作者：宋杰; 段承刚; 甘淋; 李娟; 谢华福; 刘晓...胰岛素磷酸化修饰蛋白质组双向电泳放射自显影细胞信号转导
摘要：目的：采用同位素标记、双向电泳、放射自显影结合生物信息学技术对胰岛素（insulin，Ins）在神经元中信号转导的磷酸化蛋白质组进行分析，从蛋白质磷酸化修饰的角度深入探讨Ins在神经元中的信号转导。方法：取新生乳小鼠脑组织，进行神经元原代培养7天，用^32p-NaH2PO4标记，分别加入胰岛素和培养基，分别作用0、5、20、60、120min后提取神经元蛋白。进行双向电泳，放射自显影。通过采用PDQuest 2D分析软件进行图象分析，并在Swiss—Prot蛋白质数据库和PPDB磷蛋白数据库中查询，对小鼠神经元Ins信号转导磷酸化蛋白质组进行初步分析。结果：①放射双向电泳自显影图谱显示：刺激后60min、120min蛋白质磷酸化状态发生明显改变。②采用PDQuest 2D分析软件对图谱差异分析及swiss PROT蛋白质数据库和PPDB磷蛋白数据库进行查询，提示Ins在神经元的信号传递涉及到多种不同的信号途径和效应分子。结论：采用同位素标记、双向电泳、放射自显影结合生物信息技术可对Ins刺激神经元中的蛋白质可逆磷酸化修饰进行较为全面、动态的分析，寻找出相应的差异蛋白，并可进行初步的定性分析。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
