作者:王建昌; 吴春涛; 牛钟相外膜蛋白免疫印记间接elisamtt法
摘要:采用TritonX-100裂解和0.6%KI提取的方法制备绵羊肺炎支原体Y-98株外膜蛋白,经12%SDS-PAGE分析,表明其分子量范围在14.4—125.9KD之间;分别制备抗Y-98株全细胞抗原和外膜蛋白高免血清,经Western-blotting分析,表明外膜蛋白为绵羊肺炎支原体的主要保护性抗原,而在外膜蛋白,67.6、39.3和28.8KD多肽为其主要保护性抗原。利用间接ELISA方法和MTT法对外膜蛋白引起的体液免疫和细胞免疫功能进行了测定,结果表明膜蛋白能够诱导机体产生高效价的抗体,免疫后7、14和28d效价分别达到了1:2^4.25、1:2^7.75和1:2^8.75;膜蛋白具有非特异性和特异性致有丝分裂作用,在免疫前0d及免疫后28d对T淋巴细胞刺激的转化率分别为8.46%和18.3%。
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