作者:谌月; 鲁艳; 李凌越桔正交设计直观分析方差分析
摘要:以改良CTAB法提取越桔(Vaccinium Linn.)品种薄雾DNA为材料,采用正交设计L16(45)表探讨了Tag酶;Mg^2+;DNA;dntps及引物浓度5个主要因素对越桔ISSR-PCR扩增反应的影响,通过直观分析和方差分析结合,建立了越桔ISSR-PCR(20μL)最佳反应体系,各组分的浓度为:Tag酶0.75 U,Mg^2+1.875 mmol/L,DNA 0.8mmol/L,dntp 0.1mmol/L,引物0.2μmol/L.在此基础上探讨了引物UBC835的最佳退火温度、循环次数和延伸时间,结果分别为54.2℃、35次、60s.选用两个引物对21份越桔资源进行ISSR扩增,结果显示优化的体系稳定性较高.
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