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人TroponinⅠ的表达载体构建诱导表达和纯化及活性测定

作者:吕永智; 黎波troponin表达纯化抗血管生成

摘要:以人肝脏cDNA文库为模板,通过PCR方法扩增出Troponin基因,将其克隆到pCR-TOPO质粒中,构建表达质粒pET-22b(+)-TnⅠ,转化大肠杆菌BL21(DE3)-RPX并进行诱导表达,表达的目的蛋白占菌体总蛋白的20%以上并主要以可溶形式存在。建立了TroponinⅠ的非亲和色谱纯化工艺,纯化后蛋白产量约为20mg/L.纯度在90%以上。体外活性实验表明重组蛋白具有良好的抗血管生成。

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西南农业大学学报

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