作者：姜大春 何国祥 刘建平 张倩 唐兵 李德重组腺病毒载体基因构建鉴定
摘要：目的：构建人血红素氧合酶-1（hHO-1）重组腺病毒,为基因治疗心肌细胞缺氧性损伤提供可能。方法：将hHO-1 cDNA克隆于腺病毒穿梭质粒pSGCMV,得到重组质粒pSGCMV-hHO-1。采用位点特异性重组系统（Cre/Loxp）将pSGCMV-hHO-1与腺病毒骨架载体pBHGloxP△ E3通过Lipofectamine 2000共转染至293细胞,生成带有hHO-1基因的重组腺病毒载体Ad-hHO-1。重组腺病毒质粒在293细胞中扩增,氯化铯梯度离心纯化。结果：经酶切鉴定和测序证实载体构建的正确性,病毒滴度为2.0×10^10pfu/ml。结论：成功构建带有hHO-1 cDNA的重组腺病毒,可用于对心肌细胞缺氧性损伤的基因治疗研究。
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