作者：郭雪文; 李文洋; 安冉; 余祖功内毒素恩诺沙星复方甘草酸单铵细胞凋亡
摘要：为了探索内毒素（LPS）和恩诺沙星（ENR）联合诱导鸡原代肝细胞损伤机制以及复方甘草酸单铵（CAG）的保护作用,采用改良二步灌流法分离鸡原代肝细胞,MTT法测定细胞存活率并且筛选出LPS联合ENR（LPS/ENR）致鸡肝细胞损伤的最佳剂量和CAG的保护浓度,收集细胞上清液测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）和谷氨酸氨基转移酶（AST）的含量,流式细胞计数仪测定细胞凋亡率,RT-qPCR检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）、Caspase-9、细胞色素-C（Cyt-C）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）的mRNA表达水平。结果显示：LPS/ENR的最佳浓度为（30＋80）μg/mL;与对照组相比,上清中ALT（P〈0.01）和AST（P〈0.01）极显著升高;流式细胞计数显示LPS/ENR处理后早期细胞凋亡率极显著升高（P〈0.01）;在CAG处理组,早期细胞凋亡率成浓度依赖性降低;LPS/ENR组Caspase-3（P〈0.05）、Caspase-9（P〈0.01）、Cyt-1 C（P〈0.01）、Bax（P〈0.05）的mRNA表达水平显著升高,Bcl-2明显降低。结果表明：LPS/ENR诱导的肝细胞损伤可能是通过凋亡实现的,CAG能够预防这种损伤。
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