作者：索阳; 陈继勇三重聚合酶链式反应
摘要：根椐GenBank中牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus,BVDV）、牛呼吸道合胞体病毒（bovine respiratory syncytial virus,BRSV）和牛副流感病毒3型（bovine parainfluenza virus type 3,BPIV-3）3种病毒基因序列,设计合成引物,建立3种病毒的三重RT-PCR方法。用这3对引物对同一样品中的BVDV、BRSV和BPIV-3核酸模板进行三重RT-PCR扩增,结果显示：可同时扩增BVDV的466 bp,BRSV的735 bp和BPIV-3的258 bp的特异性片段,而对其他4种病原的PCR扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该三重RT-PCR技术能检出10 pg的BVDV、1 pg的BPIV-3和10 pg的BRSV模板。用37份临床病料对本研究多重RT-PCR技术和单项RT-PCR技术进行对比验证,结果显示：两者的总符合率为100%。结果表明：建立的多重RT-PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这3种病毒的同时检测和鉴别诊断。
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