作者：田莉莉; 李林猪细小病毒vp2蛋白截短表达间接elisa诊断
摘要：参照已发表的PPV基因组序列，设计合成1对特异性引物，PCR扩增了长约810bp的VP2基因片段。将目的片段定向克隆到pE330a表达载体中，酶切及测序鉴定均正确后，转化B121表达菌，经IPTG诱导得到了以包涵体形式表达的重组蛋白。将重组蛋白变性、纯化和复性后，免疫印迹检测证明纯化的重组蛋白具有良好的抗原性和特异性。以该蛋白作为诊断抗原，建立了检测猪细小病毒抗体的VP2-ELISA诊断方法。该方法检测其他7种常见猪病病毒（PCV-2、PRV、PRRSV、JEV、PEDV、TGEV、CSFV）的阳性血清均为阴性；批内重复性试验的变异系数小于5％，批间重复性试验的变异系数小于10％；与血凝抑制（HI）相比较，符合率、敏感性和特异性分别为90．3％、86．6％和94．5％。本研究制备的重组VP2蛋白具有良好的免疫原性，以其作为包被抗原建立的PPVVP2-ELISA诊断方法具有良好的重复性、敏感性和特异性，为猪细小病毒病的快速诊断、免疫猪群抗体监测和流行病学调查提供了一种快速、简便的血清学诊断方法。
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