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J亚群禽白血病病毒gp85基因在重组杆状病毒中的表达及鉴定

作者:倪伟; 秦立廷; 孙美玉; 高玉龙; 潘伟; 王...j亚群禽白血病病毒gp85基因杆状病毒

摘要:为获得J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的gp85蛋白,将ALV—J的gp85基因克隆至pFastBac—HTA供体质粒,将其转入DHl0BacTM大肠杆菌感受态细胞,使gps5基因整合到Bacmid穿梭载体中,构建重组穿梭载体Bacmid—gp85。通过脂质体介导,将重组穿梭载体Bacmid。gp85转染SO昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBacgp85。Western-blot和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定结果表明ALV-Jgp85蛋白在Sf9昆虫细胞中得到正确表达,表达的重组gp85蛋白分子量约为38ku。ALV—Jgp85重组蛋白在Sf9细胞中的正确表达为其功能研究和应用提供了良好的基础。

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