作者：王玉玲; 赵祥平; 柴铭骏; 侯艳梅; 赵德明套式pcr检测马巴贝斯虫扩增特异性条带阳性分子流行病学调查方法重复性试验引物实际结果基因特异性试验驽巴贝斯虫巴贝斯虫病全血样本设计合成全血样品片段马匹
摘要：根据GenBank中马巴贝斯虫(Babesia equi)ema-1基因序列,设计合成内外2对引物,其中外引物扩增ema-1基因60～627nt间567bp片段,内引物扩增ema-1基因259～488nt间229 bp片段.从实验室感染马巴贝斯虫阳性马匹全血样本中提取DNA,采取2次扩增的方法,扩增到229 bp特异性条带,建立了适合马巴贝斯虫快速检测的套式PCR方法.经重复性试验和特异性试验,结果显示,马巴贝斯虫阳性样本在229bp均出现条带,而驽巴贝斯虫、牛巴贝斯虫扩增结果为阴性.采用该方法对已知阴、阳性的16份马匹全血样品进行检测,有8份为阳性,与实际结果的符合率为100%.表明,所建立的方法具有较高的重复性和特异性,可用于马巴贝斯虫病的临床诊断、病料检测和分子流行病学调查.
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