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赤羽病病毒套式RT-PCR检测方法的建立与初步应用

作者:张吉红; 黄素文; 闻伟刚; 李如松; Ji-hon...赤羽病病毒套式初步应用detectionnested牛病毒性腹泻病毒牛鼻气管炎病毒特异扩增特异性引物特异性试验敏感性试验血清样品模拟样品流产胎儿基因序列基因片段核酸含量genbank

摘要:根据GenBank中已发表的赤羽病病毒(AKAV)的S基因序列,设计了3条特异性引物,建立了检测AKAV的套式RT-PCR方法.特异性试验表明,该方法可以特异扩增出AKAV的S基因片段,但从牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、传染性牛鼻气管炎病毒(IBRV)等13种对照病毒中均不能扩增出目的条带.敏感性试验表明,套式RT-PCR能够扩增10-5稀释度的病毒RNA(核酸含量约1.18 ng/μL),比普通RT-PCR高出1 000倍.用此方法检测130份奶牛血清样品与1份流产胎儿病料,均未检测到阳性样本,但AKAV在血清模拟样品中可被有效检出.研究结果表明,该方法灵敏、特异,为AKAV的检测提供了一个快速、有效的手段.

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畜牧与兽医

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