作者:储岳峰; 高鹏程; 赵萍; 贺英; 郭晗; 逯忠...丝状支原体山羊亚种绵羊肺炎支原体双重pcr检测
摘要:通过对丝状支原体山羊亚种(M.mycoides subsp.capri,Mmc)特异性引物MmeF/MmcR和绵羊肺炎支原体(M.ovipneunwniae,Mo)特异性引物LmF/LmR退火温度、引物浓度比例等条件的选择,建立了一个可以同时检测Mmc和Mo的双重PCR方法。该方法可同时扩增出Mmc195bp和Mo361bp目的片段,但对其他病原菌不能扩增出任何条带,具有良好的特异性。敏感性试验表明,该方法能够分别检测出0.1ng的MineDNA和0.01ng的MoDNA,或同时检测出1ngMmc和1ngMo混合的DNA。用该双重PCR方法可对实验室保存的4株绵羊肺炎支原体和2株丝状支原体山羊亚种进行准确鉴定,并可从临床病料中检测出相应支原体,表明建立的双重PCR方法可用于Mmc和Mo的快速鉴定、实验室诊断和病原学调查.
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