作者:吴伟; 徐日福; 高光; 孙永峰; 王雪丽; 单...鹅cdna文库smart技术
摘要:本研究以8周龄的吉林白鹅胸肌组织为材料,利用SMART技术构建全长cDNA文库的方法,进行大片段双链cDNA扩增。经内切酶SfiⅠ酶切并以改造后具有S6ⅠA和sfiⅠB接头序列的pBluescript1ISK质粒为连接载体,进行cDNA克隆,构建质粒cDNA文库。结果表明,所构建的肌肉组织cDNA文库滴度为1.01×10^6pfu/mL,质粒的转化重组率为97%,插入cDN段的大小在0.25~1.6kb之间。随机取24个重组克隆子进行测序,所获得的unigene比率为66.7%,全长cDNA序列完整性比率为80%。将全长cDNA序列与GenBank数据库进行核苷酸同源性比较,发现其中一cDNA序列为鹅泛素Ⅰ基因。该基因的编码序列长918bp,编码由305个氨基酸组成的多聚泛素蛋白。鹅泛素ⅠcDNA序列编码区与鸡等16种动物的同源序列比较显示,其相似性为87.3%-93.7%。该文库的构建为在分子水平上研究鹅肌肉组织的生长发育奠定了基础。
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