作者：高志强 张鹤晓 赖平安 谷强 蒲静 汪琳 乔...非洲马瘟基因拼接重组elisa
摘要：采用人工拼接的方式拼接了非洲马瘟病毒（AHSV）含有绝大多数线性抗原表位的VP7编码基因片段，克隆于pET-30a构建重组质粒pET-30a-VP7，将pET-30a—VP7转化BL21（DE3），经1．0mmol／LIPTG诱导，外源基因以包涵体的形式获得高效表达。通过Dot-EuSA以及ELISA试验证明表达产物具有良好的反应原性。以纯化后表达产物作为诊断抗原包被酶标板建立了检测AHSV抗体的间接ELISA方法。结果表明，抗原的最佳包被浓度为0．25μg／mL，血清的最佳稀释度为1：40，待检血清阳性临界值初步定为0．25。用此方法和商品化ELISA试剂盒检测了184份血清样品，结果完全符合。
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