作者：石德时; 兰盛银; 洪文洲; 吴美洲; 陈焕春pkd细胞逆转录病毒介导正常细胞系基因缺失转基因细胞ea株毒株生长速度
摘要：采用逆转录病毒介导的方法,将PrV Ea株gD基因整合进PK-15细胞染色体中,建立起表达gD蛋白的细胞系PKD.通过荧光观察,发现PKD表达的gD分布在细胞膜上,具备原有的免疫反应性;同时,还发现gD蛋白在PKD细胞膜上呈明显极性分布.PCR技术和间接免疫荧光染色法对PKD进行检测的结果表明该细胞系具有良好的遗传稳定性.在相同培养条件下,PKD细胞的生长速度及形态与正常PK-15细胞无明显差异.用脂质体介导的方法,将PrV Ea株基因组转染PKD细胞,在转染后30 h细胞发生典型病变,表明PKD细胞对脂质体的毒害具有耐受性.TCID50测定结果显示:PKD对PrV Ea株增殖尽管有明显的抑制作用,但PrV Ea株仍能在其上正常增殖.上述研究结果提示:所构建的细胞系PKD可用于构建PrV Ea株 gD基因缺失毒株,为PrV Ea株gD基因缺失毒株的构建提供了必备的工具.
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
