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刺糖精多糖对巨噬细胞RAW264.7免疫活性的影响研究

作者:韩曾姣; 贺家勇; 常军民刺糖多糖免疫活性

摘要:目的 探讨不同浓度刺糖精多糖对巨噬细胞RAW264.7免疫活性的影响。方法 以正常培养的小鼠巨噬细胞RAW264.7为正常对照组,小鼠巨噬细胞加入1 mg/mL脂多糖(LPS)为LPS组,采用刺糖精多糖(12.5、25、50、100、200μg/mL)作用巨噬细胞RAW264.7 24h和48h为实验组,采用CCK-8法检测巨噬细胞的增殖。以刺糖精多糖及LPS作用巨噬细胞RAW264.7 24、48h,收集细胞培养上清液,用Griess试剂盒检测细胞培养上清中一氧化氮(NO)含量。采用中性红吞噬实验检测吞噬活性,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测刺糖精多糖不同浓度(12.5、25、50、100、200μg/mL)及不同作用时间(24h和48h)培养上清液中肿瘤坏死因子(TNF-α)含量。结果 刺糖精多糖对巨噬细胞RAW264.7作用24、48h后,与空白对照组比较,质量浓度为12.5、25、50、100、200μg/mL的刺糖精多糖均能够促进巨噬细胞RAW264.7的增殖,差异有统计学意义(P〈0.05)。质量浓度为12.5、25、50、100、200μg/mL的刺糖精多糖和1mg/mL LPS作用于巨噬细胞RAW264.7 24h和48h后,NO生成量明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。当多糖质量浓度为100、200μg/mL时,NO生成量高于LPS组,差异有统计学意义(P〈0.05)。在一定浓度范围,多糖作用巨噬细胞后NO的生成量随刺糖精多糖浓度的增加而增加,线性回归方程为:Y=0.0108 X+0.0777,R2=0.997。刺糖精多糖浓度在12.5、25、50、100、200μg/mL时,能明显地增强RAW264.7细胞的吞噬能力(P〈0.05),且刺糖精多糖促进细胞吞噬的能力明显强于LPS(P〈0.05)。刺糖精多糖各剂量组能刺激小鼠巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子TNF-α,并随着刺糖精多糖剂量的增加,TNF-α的分泌量逐渐升高。除正常对照组外,各组48h时TNF-α的含量高于24h。结论 不同浓度的刺糖精多糖和LPS作用巨噬细胞RAW264.7后,刺糖精多糖能够促进巨噬细胞RAW264.7的增殖和吞噬功能�

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