作者：詹振宏 黄锡霞 田可川 吴伟伟 哈尼克孜·...新吉细毛羊cdna文库质量评价ests序列分析
摘要：通过对已构建新吉细毛羊皮肤组织的均一化全长cDNA文库进行活化，在此基础上进行EST生物信息学分析研究，期望能发现影响细毛羊羊毛性状的主效基因或相关基因。运用菌落PCR、菌液PCR、质粒快速鉴定3种方法对cDNA文库进行评价，通过测序，在NCBI上BLASTn搜索、比对及运用DNAstar等软件进行分析。初步鉴定的结果：cDNA文库的库容量（滴度）为1．57×10。pfu／mL，菌落PCR、菌液PCR阳性克隆的小片段率在80％～90％，克隆的片段大小在0．6～2．0kb，cDNA在300～500bp，而质粒快速鉴定的在90％，克隆的片段载体带大小3．5～5．0kb。质粒快速鉴定的效果好于其他两种方法，耗时相对短，同时小片段率高；cDNA文库保存完好，符合基因文库的质量要求，有足够大的库容量来保证筛选目的基因。通过对筛选的阳性克隆5’端随机测序，随后获得可读序列169条，经过相关生物信息查询之后，发现其中可能含有完整基因。
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