作者：李珊; 吕安林; 王海昌; 邱翠婷; 马晓磊; ...能量限制
摘要：目的研究能量限制 （calorie restriction，CR）激活沉默信息调节因子2相关酶Ⅰ（Sirt1）在缺血/再灌注损伤（ ischemia reperfusion injury,I/RI）中对心肌细胞的保护作用及其机制。方法心肌细胞系H9c2以5×105/L接种于6孔细胞培养板中，随机分为4组：对照（Con）组、缺氧复氧（hypoxia/re-oxygenation，H/R）组、H/R＋低糖预处理（H/R＋CR）组和H/R＋低糖预处理＋Sirt1抑制剂EX527（H/R＋CR＋EX527）组,其中Con和H/R组使用葡萄糖浓度为4.5 g/L的培养基，而H/R＋CR组和H/R＋CR＋EX527组则使用葡萄糖浓度为 1.5 g/L的培养基，每组设置3个复孔，进行缺氧5 h复氧1 h，用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧（ROS）的水平，四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测细胞的活性，末端标记法（TUNEL）染色法检测细胞的凋亡水平，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Sirt1和磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（P-AMPK）的表达。结果与H/R组（0.31±0.06）相比，H/R＋CR组（0.11±0.02）细胞内ROS的水平明显减少（P〈0.05）；H/R＋CR＋EX527组（0.55±0.06）细胞内ROS的水平明显增多（P〈0.05）；与H/R组（0.23±0.01）相比，H/R＋CR组（0.64±0.02）细胞活性明显上升（P〈0.05）；H/R＋CR＋EX527组（0.09±0.005）细胞活性明显下降（P〈0.05）；与H/R组（0.444±0.038）相比，H/R＋CR组（0.222±0.556）细胞凋亡水平明显降低（P〈0.05）；H/R＋CR＋EX527组（0.578±0.0129）细胞凋亡水平明显提高（P〈0.05）；与H/R组（2.229±0.019）相比，H/R＋CR组（3.712±0.010）Sirt1的表达水平明显增加（P〈0.05）；而H/R＋CR＋EX527组（1.603±0.134）Sirt1的表达水平明显降低（P〈0.05）；与H/R相（1.262±0.064）比，H/R＋CR组（1.893±0.122）P-AMPK的表达水平明显增加（P〈0.05）；而H/R＋CR＋EX527组（0.734±0.069）P-AMPK的表达水平明显降低（P〈0.05）。结论在I/RI中，CR可能通过AMPK途径激活Sirt1，进�
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