作者:李爱群; 黄桢钧; 刘少军干扰小分子干扰rna细胞自噬
摘要:目的设计Cofilin-1的小分子干扰RNA(siRNA),并利用该方法初步探索干扰Cofilin-1对细胞自噬的影响。方法利用在线软件及根据文献报道设计出3对靶向人Cofilin-1的siRNA,转染人胚肾细胞HEK293,蛋白免疫印迹法检测细胞Cofilin-1、p62、LC3Ⅰ及LC3Ⅱ蛋白的表达变化。mRFP-GFP-LC3双荧光观察细胞自噬流(自噬体及自噬溶酶体的变化)。结果蛋白免疫印迹法证实siRNA-a及siRNA-b有较好的干扰效果。成功干扰Cofilin-1后,HEK293细胞的p62表达下调、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值增大、自噬体和自噬溶酶体增多。结论 siRNA能有效干扰Cofilin-1的表达,Cofilin-1参与细胞自噬过程。
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