作者：尤宏钊; 李玉琳; 乔博康; 王绿娅; 陈博雅...缺血再灌注损伤蛋白质组学生物信息学膜蛋白
摘要：目的：应用相对和绝对定量的同位素标记（iTRAQ）结合液相色谱和质谱技术,对小鼠缺血再灌注损伤心脏组织膜蛋白进行鉴定和定量分析。方法：选取C57小鼠,15只,分为正常组和缺血再灌注损伤（I/R）组。I/R组结扎前降支30min,分别于1d和3d后处死,收取正常组及再灌注损伤组小鼠的心脏组织。采用梯度离心纯化膜蛋白,并免疫印迹膜蛋白检测纯度。利用iTRAQ技术检测I/R后1d、3d及正常对照心脏组织中的膜蛋白质,鉴定出显著差异表达蛋白质（差异倍数〉1.5或者〈0.67,P〈0.05）并结合公共数据信息,探讨差异蛋白的生物学信息及信号通路。结果：共检测出2 224种蛋白质,具有跨膜结构共有901个。与正常心脏组织相比,I/R后1d共有211个膜蛋白显著升高,有217个蛋白显著降低,均为P〈0.05;与I/R后1d相比,I/R后3d组有205个膜蛋白显著升高,222个膜蛋白显著降低,均为P〈0.05。生物信息学分析差异蛋白发现,I/R早期（1d和3d）,膜蛋白所涉及的生物进程主要是能量代谢和氧化磷酸化,主要涉及的通路是氧化应激、能量代谢和心肌收缩。结论：iTRAQ技术可有效地用于组织蛋白鉴定和定量,利于发现膜蛋白与I/R早期病理变化的关系,为I/R的干预寻找潜在的治疗靶点。
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