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兔血管内皮祖细胞的分离及诱导分化

作者:王盛; 管珩骨髓血管内皮祖细胞分离诱导动物实验

摘要:目的:探讨自兔骨髓中分离及诱导血管内皮祖细胞(EPCs)的方法。方法:抽取兔骨髓,Ficoll离心液梯度离心,分离出骨髓单个核细胞,用含有血管内皮生长因子(VEGF)、碱性纤维细胞生长因子(bFGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的M199培养液诱导培养EPCs,透射电镜及免疫荧光法对所培养细胞进行鉴定。结果:细胞诱导培养48-72h后即可见有细胞贴壁,逐渐变成梭形。培养至8d左右,可观察到数条由梭形贴壁细胞直线生长连接而成的条索,7-10d出现多个细胞团,贴壁的梭形细胞开始从细胞团的边缘出芽长出,培养至14d左右,细胞逐渐融合,连接成大片条索状结构。透射电镜及免疫荧光检查证实为血管内皮祖细胞。结论:梯度离心法白兔骨髓获得单个核细胞,在体外经诱导分化可获得血管内皮祖细胞。

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心肺血管病

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