作者：黄波 田大力 杨春鹿小细胞肺癌abce1基因绿色荧光蛋白
摘要：目的：构建ABCE1基因的pEGFP重组表达载体pEGFP—C11ABCE1，并将其转染至小细胞肺癌细胞（NCI—H446），观察其表达，并检测转染前后细胞增殖情况。方法：RT—PCR扩增ABCE1基因cDNA，酶切后和携带绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体pEGFP—C1重组获得重组表达载体pEGFP—C1-ABCE1。经酶切，电泳，DNA测序鉴定后应用Fugene—HD将重组表达载体pEGFP—C1-ABCE1及空载体pEGFP—C1分别转染NCI—H446细胞，观察pEGFP—C1-ABCE1和pEGFP—C1在小细胞肺癌细胞的表达，MTT法检测转染ABCE1基因对小细胞肺癌细胞增殖的影响。结果：ABCE1基因eDN段成功重组到pEGFP—C1载体中。经酶切和DNA测序验证，插入载体的eDN段为ABCE1基因。荧光显微镜观察转染pEGFP—C1-ABCE1的NCI—H446细胞绿色荧光蛋白主要在胞浆表达而转染pEGFP—C1的NCI—H446细胞绿色荧光蛋白在胞浆及胞核均有表达。MTT实验提示转染pEGFP—C1-ABCE1的细胞与转染pEGFP—C1和未转染的同类细胞相比增殖能力明显增加。结论：成功构建了pEGFP—C1-ABCE1真核细胞重组表达载体，并将该载体转染入小细胞肺癌细胞，该载体的绿色荧光主要在NCI—H446细胞胞质表达，提示ABCEI基因可能主要在胞质表达。该基因与小细胞肺癌的增殖活性有关。
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