作者：杨琨; 李骏; 丰奇昊; 沈梦杰; 陈谦谦; 罗...牙胚间质干细胞p75神经营养因子受体外胚间充质干细胞时钟节律神经生长因子时间生物学大鼠
摘要：目的 研究p75神经营养因子受体（p75NTR）、神经生长因子（NGF）及相关时钟节律基因clock、per1、per2、Bmal1在24 h内的表达情况。方法 取SD大鼠孕18.5 d胎鼠牙胚组织,采用组织块法培养牙胚来源外胚间充质干细胞（EMSCs）。流式细胞仪进行EMSCs表面分子鉴定CD14、CD29、CD44、CD45、CD90、CD105、CD146、CD166和p75NTR,流式细胞仪分选出p75NTR阳性的EMSCs。取分选后的第3代进行实验,血清休克试验进行细胞时钟节律性的诱发,在诱发后的0、4、8、12、16、20、24 h进行细胞收集,提取RNA;RealTime-PCR检测p75NTR、NGF、clock、per1、per2、Bmal1在24 h内不同时间点的表达量。结果 组织块法成功培养出牙胚来源的EMSCs,经流式细胞仪检测细胞阳性表达CD14（93.58%）、CD29（95.16%）、CD44（98.66%）、CD90（92.72%）、CD105（28.50%）、CD146（95.21%）、CD166（97.23%）和p75NTR（90.18%）,阴性表达CD45（0.43%）;流式细胞仪成功分选p75NTR阳性EMSCs,细胞形态呈更为均一的间充质干细胞形态;RealTime-PCR检测p75NTR、NGF、clock、per1、per2、Bmal1不同时间点的表达量,呈现出一定的时钟节律性。结论 p75NTR与NGF及相关时钟基因在牙胚来源的EMSCs中呈节律性表达,p75NTR有可能成为时间生物学在牙齿领域研究进展中的关键性生物节律调控基因。
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