作者：张文元; 杨亚冬; 贺晨; 房国坚; 陈勇诱导条件软骨细胞成骨细胞骨髓间充质干细胞甲苯胺蓝染色骨矿化msc定向分化体外分离定向诱导分化
摘要：目的:探讨兔骨髓间充质干细胞(MSC)体外分离培养、增殖,以及向成骨细胞和软骨细胞定向诱导分化的条件,为骨、软骨缺损的修复和重建提供种子细胞.方法:抽取兔髂骨及胫骨的骨髓液,经密度梯度离心法及塑料板贴壁培养法分离纯化出MSC,并增殖.对第二代MSC进行成骨矿化诱导,测定其碱性磷欧酶(ALP)活性及成骨矿化情况.并对第二代MSC进行诱软骨特定培养液诱导,对诱导细胞进行甲苯胺蓝染色,测定诱导后的软骨细胞表型.结果:MSC为梭型的成纤维细胞样贴壁生长,增殖能力强.在成骨诱导剂作用下,MSC具有成骨能力,诱导后ALP活性明显提高,并且出现矿化结节沉积.在成软骨诱导剂作用下,可见细胞由成纤维样的梭形变为椭圆形及肾形,并分泌基质,甲苯胺蓝染色呈阳性,表现为软骨细胞分化特点.结论:在特定诱导条件下,兔骨髓MSC体外可定向诱导分化为成骨细胞和软骨细胞,可用于组织工程骨和软骨组织的修复和重建.
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