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应用实时荧光定量PCR筛选TRF2siRNA最佳靶序列

作者:陈绍坤 刘岚 税青林 曾永秋 赵娇 黄燕rna干扰sirna实时荧光定pcrtrf2

摘要:有效siRNA的筛选是RNAi研究的关键点之一。[目的]筛选有效的TRF2siRNA,为应用RNAi技术抗TRF2研究提供实验基础。[方法]采用化学合成法合成3段针对TRF2的siRNA、应用脂质体LipofectamineTM2000转染试剂将3段siRNA转染人乳腺癌MCF-7细胞、契耐荧光定量RT~PCR技术检测TRF2mRNA表达水平以确定干扰效果。[结果]3段TRF2siRNA中有2段siRNA可有效降低TRF2mRNA表达。[结论]利用化学合成法合成siRNA,应用实时荧光定量PCR技术检测目的基因干扰效果可用于快速、高效筛选特异性基园表达抑制的siRNA。

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现代预防医学

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