作者:倪虹 丁显平 曾索宫颈癌survivinrna干扰caski
摘要:[目的]探讨RNA干扰对Caski细胞Survivin基因表达的抑制作用。[方法]构建针对Survivin基因编码区和非编码区的两对短发夹状RNA真核表达载体,分别命名为pGenSur1、pGenSur2。以脂质体介导的转染方法将其导入宫颈癌Caski细胞株.采用荧光定量RT—PCR和westernblot检测转染后24、48、72hSurvivin基因mRNA和蛋白质表达水平。[结果]成功构建Survivin基因shRNA真核表达载体pGenSur1、pGenSur2。与野生型Caski细胞、阴性对照相比.Caski/pGenSurl细胞和Caski/pGenSur2细胞中SurvivinmRNA和蛋白表达随着干扰时间增加有显著性减少(P〈0.01).72h到达最低值.mRNA抑制效率分别达到63.3%±1.44%和79.7%±2.12%,蛋白抑制效率达到64.2%±2.02%和79.4%±1.77%。[结论]靶向Survivin的shRNA质粒载体均可显著抑制宫颈癌Caski细胞内源Survivin的mRNA和蛋白的表达(P〈0.01)。
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