作者：王娟; 张遵真; 党静; 张勤乙烯雌酚雌激素活性扩增延长剂量酵母chc酶活性检测环境振荡培养
摘要：目的:探讨重组酵母测评系统中影响β-半乳糖苷酶活性的因素.方法:以乙烯雌酚为受试物,研究在检测环境雌激素的重组酵母测评系统中,振荡和非振荡培养、酵母扩增时间、受试物作用时间和裂解方式等对酶活性的影响.结果:在非振荡培养条件下,可检出乙烯雌酚的雌激素活性,且与振荡培养条件下的雌激素活性差异无统计学意义(P＞0.05).非振荡培养时,在18～30 h内,随酵母扩增时间的延长,酶活性逐渐增加,30 h后,酶活性则随扩增时间的延长而逐渐降低;各剂量组的乙烯雌酚作用时间以30 h时酶活性最高,若将作用时间延长至48h,酶活性则明显下降(P＜0.01);在不同裂解方式下,各剂量组乙烯雌酚的酶活性大小顺序为:液氮裂解＞Y-PER裂解＞彗星实验裂解液裂解＞SDS+氯仿(CHCl3)裂解＞超声破碎.结论:重组酵母测评系统检测环境雌激素的优化组合为:恒温培养箱中酵母扩增24～30 h,受试物作用30 h,Y-PER或液氮裂解酵母细胞.
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