作者：杨柳; 王茂春; 肖君华; 周宇荀; 李凯; 曲...实时定量pcr芯片后肢发育hox基因
摘要：目的：胚胎生育过程中因肢体发育异常造成的出生缺陷比率不低,其相关基因表达模式尚不明确。本实验通过建立实时定量PCR芯片（Real-time quantitative polymerasechain reaction array,qPCR array）检测方案,研究C57BL/6品系小鼠后肢发育相关基因的表达谱。方法：以同源异形盒基因家族（Hox）、Wnt5a、配对同源结构域基因（Pitx1）、成纤维生长因子（Fgf8）、音猬因子（Shh）等小鼠肢体发育相关的重要基因制作基因检测表达谱,以C57BL/6品系怀孕雌鼠为材料,取胚胎肢芽发育的四个关键时期（E10.5,E11.5,E12.5,E13.5）的胎鼠后肢,利用qPCR array方案检测表达谱中基因的相对表达水平差异。结果：通过已建立的qPCR array检测了C57BL/6品系小鼠胚胎后肢发育时期Hox家族、Wnt5a、Pitx1、Fgf8、Shh等基因的表达差异。以E10.5为对照,检测出在后肢发育时期基因呈三种表达模式,即Hoxb6、Hoxb8、Hoxc8、Hoxc9、Hoxc10、Hoxd9和Shh基因的表达水平呈上调;Hoxa11、Hoxa13、Hoxc12、Hoxc13、Hoxd13等基因表达出现下调;Hoxc9、Hoxc10、Hoxc11、Hoxd9、Hoxd12、Fgf8和Pitx1等基因的相对表达量呈先上调后下调的曲线表达模式,且有少部分基因在小鼠后肢发育时期表达水平无明显变化。结论：Hox家族、Wnt5a、Pitx1、Fgf8、Shh等基因在小鼠后肢发育时期表达,并且表达模式存在明显差异。
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