作者:柏宏坚; 孙建; 何礼贤; 揭志军人肺成纤维细胞白三烯受体1嗜酸粒细胞趋化因子白三烯d4白介素13montelukast
摘要:探讨白三烯D4(LTD4)和白介素13(IL-13)对人肺成纤维细胞白三烯受体(CysLT1R)表达和eotaxin产生的影响。采用培养人肺成纤维细胞株(MRC-5),以不同浓度的IL-13进行刺激,用实时定量RT—PCR法测定CysLT1R mRNA表达的变化。再以不同浓度的LTD4和IL-13刺激,用ELISA法测定上清液中eotaxin的浓度,并观察Montelukast对eotaxin的产生是否有抑制作用。结果显示,培养的人肺成纤维细胞上存在着CysLT1R mRNA的低表达,以10ng/ml IL-13刺激时,随着刺激时间延长,CysLT1R mRNA表达逐渐增高,48h达高峰,较未刺激时表达增加(18.56±7.41)倍(P〈0.01)。当以10ng/ml和100ng/ml的IL-13浓度刺激48h时,较未刺激细胞CysLT1R mRNA表达分别增加(17.33±3.81)倍和(20.11±5.05)倍(P〈0.01)。IL-13也能促进成纤维细胞产生eotaxin,以10ng/ml和100ng/ml的IL-13刺激成纤维细胞时,eotaxin浓度分别为(155.43±15.95)pg/ml和(221.31±17.23)pg/ml,较未刺激细胞(31.67±3.49)pg/ml明显增加(P〈0.01)。单独给予LTD4刺激时,eotaxin浓度则无明显变化。但是以1×10^-7mol/L和1×10^-6mol/L浓度的LTD4分别联合10ng/ml的IL-13共同刺激时,产生eotaxin的浓度分别为(204.4±25.4)pg/m和(255.1±38.3)pg/ml;较仅给予10ng/ml的IL-13刺激时(155.4±16.0)pg/ml明显增加(P〈0.01)。在LTD4+IL-13刺激组中,加入Mointelukast后eotaxin浓度为(148.3±15.7)pg/ml,较不加Montelukast(204.4±25.4)pg/ml明显降低(P〈0.01)。人肺纤维细胞存在着CysLT1R mRNA的低表达,IL-13能够上调其表达,呈现时间与浓度依赖性。IL-13和LTD4对人肺成纤维细胞分泌的eoitaxin具有协同刺激作用,这可能与IL-13上调成纤维细胞CysLT1R mRNA表达有关。而Montelukast对这种刺激具有拮抗作用。
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