作者：谢海坤; 焦健; 樊秀彩; 张颖; 姜建福; 孙...中国野生葡萄叶绿体分离cpdna提取柱式植物叶绿体dnaout
摘要：以中国野生刺葡萄、山葡萄、桑叶葡萄和东南葡萄的成熟叶片为材料,比较柱式植物叶绿体DNAout试剂盒和改良的高盐-低pH法分离叶绿体及提取cpDNA效果。结果显示:（1）2种方法均分离得到了中国野生葡萄的叶绿体,但与柱式植物叶绿体DNAout试剂盒相比,改良的高盐-低pH法得到的叶绿体浓度高、杂质少,更适合中国野生葡萄叶绿体分离。（2）柱式植物叶绿体DNAout试剂盒提取的cpDNA,其OD260/OD280在1.281.36之间,质量浓度为4.27.8ng·μL-1,质量低,不能满足后续测序要求;而改良的高盐-低pH法提取的cpDNA,其OD260/OD280值在1.841.90之间,质量浓度为2 514.44 133.7ng·μL-1,质量高,纯度好,能满足后续测序要求。研究表明,改良的高盐-低pH法能简便、快速获得中国野生葡萄完整叶绿体及高质量cpDNA,并且提取的cpDNA可满足后续测序要求,为葡萄属植物叶绿体基因组的深入研究奠定了基础。
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