作者：吴庆丰; 王崇英; 王新宇; 李志孝; 王亚馥山黧豆蛋白质提取蛋白质组学
摘要：以山黧豆叶片为材料，比较分析了蛋白质的不同提取方法，在此基础上着重于样品制备。对IPG胶条的选择，第一向等电聚焦和第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的电泳程序及参数、染色方法等相关技术进行了比较和条件优化。结果显示：采用TCA-丙酮沉淀法提取蛋白质，裂解液中加入Tris-base作为蛋白酶抑制剂，等电聚焦电泳时延长低电压的电泳时间（30V、12h，500V、1h，1000V、2h）以促进盐离子泳出的方法对山黧豆叶片蛋白质进行双向电泳，并用考马斯亮蓝和银染复合染色法进行凝胶染色，能够获得蛋白点清晰的双向电泳图谱，说明用优化后的方法建立起的山黧豆叶片蛋白质双向电泳技术，蛋白质样品制备质量好，电泳分辨率高，完全适合于进一步的蛋白质组学研究。
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