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DNA的G四链体抗体的制备和鉴定

作者:张毅强 兰晓瑜 王爽 李美宁 刘志荣 申金...g四链体原核表达载体组氨酸标签

摘要:目的构建DNA的G四链体抗体的原核表达质粒,利用BL21(DE3)菌表达此抗体,并进行纯化及鉴定。方法化学合成DNA的G四链体抗体的基因BC,4,插入以pET-26b(+)为骨架构建的载体pSANGl0中,构建DNA的G四链体抗体表达载体pSANGl0-BG4。以大肠杆菌B121(DE3)为宿主菌进行该抗体的自诱导表达,渗透压裂解法收集此抗体,并经His亲和层析纯化,用SDS-PAGE及Western blot法鉴定此抗体,并在SW480结肠癌细胞中验证此抗体功能。结果DNA的G四链体抗体表达载体经双酶切及基因测序鉴定构建成功。该抗体相对分子质量(M1)为30000~37000,以可溶性的形式表达于BL21菌细胞间质,表达产物与目的蛋白大小一致。结论成功制备了DNA的G四链体抗体。

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细胞与分子免疫学

《细胞与分子免疫学杂志》(CN:61-1304/R)是一本有较高学术价值的大型月刊,自创刊以来,选题新奇而不失报道广度,服务大众而不失理论高度。颇受业界和广大读者的关注和好评。 《细胞与分子免疫学杂志》报道我国生物学领域细胞免疫、抗体工程和分子免疫学方面的理论及应用研究成果。被国立医学图书馆生物医学检索系统收录。

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