作者：林志娟 梁淑娟 王焕芹 李艳平 肖伟玲肝癌nk细胞促炎性细胞因子干扰素
摘要：目的：构建应用于小鼠肝脏内表达和研究的IL-1β肝癌细胞特异性表达载体，观察其对小鼠Hepal-6细胞体外增殖活性、迁移能力及干扰素增殖抑制效应等体外生物学行为的影响。方法：由C57BL／6小鼠腹腔液巨噬细胞扩增IL－1β基因，构建肝脏特异性pLIVE-IL-1β重组表达载体。利用transiT－LTl将鉴定后的pLIVE—IL-1β转染至Hepal-6肝癌细胞，RT—PCR及双抗体夹心ELISA法分析转染前后IL－1表达水平，MTT法分析IL－1对细胞体外增殖活性的影响；利用细胞划痕实验分析对其迁移能力的影响，并确定对IFN－α诱导的细胞增殖抑制效应的作用。结果：重组载体经限制性酶谱分析酶解出822bp的条带，其序列与GenBank登录的小鼠IL－1β基因一致；转染后的Hepal-6细胞培养上清中IL－1β的表达明显增高，细胞体外增殖速度明显加快；给予IFN－α作用后，IL－1β的表达使细胞对于扰素的抵抗性明显增强。结论：小鼠IL－1β肝癌组织特异性表达载体pLIVE—IL一1β能够在小鼠肝癌细胞中高效表达IL一1β，并能够显著促进肿瘤的体外增殖和迁移能力，削弱IFN-α对Hepal-6细胞的增殖抑制作用。
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