作者:陈亮 高云英 王华茂 徐蓉 刘素霞 李宗海t7噬菌体p11蛋白原核表达单克隆抗体
摘要:目的:表达、纯化T7噬菌体衣壳蛋白P11,并制备其单克隆抗体(mAb)。方法:克隆并表达T7噬菌体P11蛋白,其氨基端带有6-His标签。纯化后的蛋白免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性mAb。结果:成功表达了P11蛋白。SDS—PAGE显示所表达蛋白的相对分子质量(Mr)约为27000。获得了1株稳定分泌抗P11抗体的杂交瘤细胞株(2G11),其分泌的mAb的Ig亚类(型)为IgG2b。ELISA检测,对应腹水mAb的效价为1:8.1×10^5。Western blot结果显示抗P11 mAb具有良好的特异性。结论:成功地制备了P11蛋白及其mAb。
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