作者：吴元明 张晓楠 韩者艺 李春英 陈南春shrna表达载体rna干涉hif1基因
摘要：目的：构建用于RNAi的shRNA（small hairpin RNA）表达载体及检测其对低氧诱导因子-1（Hypoxia-inducible Factor-1，HIF1）基因的沉默效果。方法：从人血基因组中PCR扩增出H1基因启动子，克隆入酶切处理后的pEGFP-C1载体片段中，此载体命名为pWH1。以人HIF1 cDNA基因为靶标设计引物，退火后克隆入pWH1。新的载体转染SGC7901细胞，然后用RT-PCR和Western blot检测HIF1基因的表达改变。结果：构建的pWH1载体能很好地表达针对HIF1基因的shRNA，RT-PCR和Western blot的结果显示HIF1基因的mRNA和蛋白表达水平均明显下降。结论：成功构建了shRNA表达载体pWH1，这对于基因的功能研究具有重要的意义。
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