作者:杨新星; 郝友华; 宋娜; 陈玲; 刘贽; 杨东...t淋巴细胞生物素化
摘要:目的:构建2种HBV抗原肽-HLA-A+2402复合物四聚体,并初步用该2种四聚体检测针对不同抗原肽特异性的细胞毒性T细胞(CTL)。方法:原核高效表达HLA-A+2402-BSP和β2m蛋白后,分别与乙型肝炎病毒抗原肽P01756-764和Corell7-125在体外复性折叠成可溶性的HLA-A+2402抗原肽复合物单体,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化复合物单体,分别将复合物单体与藻红蛋白标记的链霉亲和素按一定比例耦合构建成2种HBV抗原肽四聚体。最后进行流式细胞术检测。结果:Dot-ELISA和ELISA检测显示获得了2种具有天然构象的生物素化的HBV抗原肽-HLA-A+2402复合物单体。结论:构建的2种四聚体可以检测乙型肝炎感染者体内特异性的CTL。
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